In vivo binding by <i>Arabidopsis</i> SPLICING FACTOR 1 shifts 3′ splice-site choice, regulating circadian rhythms and immunity in plants

Y Yamila Carla Agrofoglio (Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) M María José Iglesias (Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) M María José de Leone (Fundación Instituto Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires–Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) C Carlos Esteban Hernando (Fundación Instituto Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires–Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) M Martin Lewinski (RNA Biology and Molecular Physiology, Faculty of Biology, Bielefeld University) S Sol Belén Torres (Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) G Giuliana Contino (Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) K Kim Joelle Köhnke (RNA Biology and Molecular Physiology, Faculty of Biology, Bielefeld University) M Marcelo Javier Yanovsky (Fundación Instituto Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires–Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas) D Dorothee Staiger (RNA Biology and Molecular Physiology, Faculty of Biology, Bielefeld University) J Julieta Lisa Mateos (Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas)

Abstract

Alternative splicing expands proteome diversity and enables phenotypic plasticity across eukaryotes. In plants, mutations in spliceosomal components impair development and stress responses, but the molecular mechanisms remain unclear. Here, we define the molecular function of SPLICING FACTOR 1 (AtSF1) in Arabidopsis thaliana using individual-nucleotide resolution UV crosslinking and immunoprecipitation combined with RNA sequencing of sf1 mutants. We identify the in vivo branch point sequences bound by AtSF1 and delineate its RNA-binding landscape, revealing pervasive splicing defects dominated by aberrant 3′ splice-site selection. Structural comparison with human SF1 indicates that AtSF1 retains branch point recognition capacity but features a distinct domain organization, including a restructured C-terminal region absent in metazoans, suggesting a divergent RNA-binding mode that evolved to meet plant-specific splicing demands. AtSF1 targets are enriched for core circadian clock and defense genes, consistent with the long-period phenotype and immune-compromised phenotypes of sf1 mutants. Together, these findings establish that AtSF1 orchestrates alternative 3′ splice-site choice through intron binding and branch point recognition, coupling RNA processing with circadian and immune regulation in plants.

Article Details

Volume / Issue Vol. 123, Issue 23
Published June 09, 2026
ISSN 0027-8424
Publisher National Academy of Sciences

Authors (11)

Y

Yamila Carla Agrofoglio

Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

M

María José Iglesias

Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

M

María José de Leone

Fundación Instituto Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires–Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

C

Carlos Esteban Hernando

Fundación Instituto Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires–Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

M

Martin Lewinski

RNA Biology and Molecular Physiology, Faculty of Biology, Bielefeld University

S

Sol Belén Torres

Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

G

Giuliana Contino

Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

K

Kim Joelle Köhnke

RNA Biology and Molecular Physiology, Faculty of Biology, Bielefeld University

M

Marcelo Javier Yanovsky

Fundación Instituto Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires–Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

D

Dorothee Staiger

RNA Biology and Molecular Physiology, Faculty of Biology, Bielefeld University

J

Julieta Lisa Mateos

Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular and Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas