Evolutionarily conserved grammar rules viral factories of amoeba-infecting members of the hyperdiverse <i>Nucleocytoviricota</i> phylum

S Sofia Rigou (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) A Alain Schmitt (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) A Anaísa B. Moreno (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) A Audrey Lartigue (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) L Lucile Danner (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) L Lotte Mayer (Division of Microbial Ecology, Centre for Microbiology and Environmental Systems Science, University of Vienna) C Claire Giry (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) F Feres Trabelsi (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) L Lucid Belmudes (Biosciences et Bioingénierie pour la Santé, Université Grenoble Alpes, INSERM, Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives, CNRS, CEA, FR2048) N Natalia Olivero-Deibe (Immunovirology Lab, Institut Pasteur de Montevideo) H Hugo Le Guenno (Microscopy Core Facility, CNRS, Institut de Microbiologie de la Méditerranée, Aix-Marseille University) Y Yohann Couté (Biosciences et Bioingénierie pour la Santé, Université Grenoble Alpes, INSERM, Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives, CNRS, CEA, FR2048) M Mabel Berois (Virology department, Instituto de Química Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad de la República) M Matthieu Legendre (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) S Sandra Jeudy (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) C Chantal Abergel (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University) H Hugo Bisio (Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University)

Abstract

Despite sharing fewer than 10 core genes, the hyperdiverse Nucleocytoviricota phylum (ranging from poxviruses to giant viruses) universally assembles viral factories (VFs) resembling biomolecular condensates. Regardless, it is unclear how these viruses achieve such a level of functional conservation without clear conserved genetic information. We demonstrate that the VFs produced by amoeba-infecting viruses have liquid-like properties and identify a conserved molecular grammar governing viral factory scaffold protein: charge-patterned intrinsically disordered regions that drive phase separation independently of sequence homology. This grammar predicts functional scaffold proteins across the 15 viral families, revealing evolutionary constraints invisible to sequence or structural analysis. Strikingly, VFs exhibit subcompartmentalization analogous to nuclei, segregating transcription and mRNA processing (inner condensates) from replication (interphase zones) and translation (host cytoplasm). Our work establishes phase separation as a fundamental organizational principle bridging extreme genomic diversity, explaining how biological complexity emerges without gene conservation. This grammar is likely also conserved in non-amoeba-infecting members of the phylum and thus may represent a primordial solution for organelle-like organization, with broad implications for antiviral targeting.

Article Details

Volume / Issue Vol. 122, Issue 35
Published September 02, 2025
ISSN 0027-8424
Publisher National Academy of Sciences

Authors (17)

S

Sofia Rigou

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

A

Alain Schmitt

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

A

Anaísa B. Moreno

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

A

Audrey Lartigue

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

L

Lucile Danner

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

L

Lotte Mayer

Division of Microbial Ecology, Centre for Microbiology and Environmental Systems Science, University of Vienna

C

Claire Giry

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

F

Feres Trabelsi

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

L

Lucid Belmudes

Biosciences et Bioingénierie pour la Santé, Université Grenoble Alpes, INSERM, Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives, CNRS, CEA, FR2048

N

Natalia Olivero-Deibe

Immunovirology Lab, Institut Pasteur de Montevideo

H

Hugo Le Guenno

Microscopy Core Facility, CNRS, Institut de Microbiologie de la Méditerranée, Aix-Marseille University

Y

Yohann Couté

Biosciences et Bioingénierie pour la Santé, Université Grenoble Alpes, INSERM, Commissariat à l'énergie atomique et aux énergies alternatives, CNRS, CEA, FR2048

M

Mabel Berois

Virology department, Instituto de Química Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad de la República

M

Matthieu Legendre

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

S

Sandra Jeudy

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

C

Chantal Abergel

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University

H

Hugo Bisio

Information Génomique and Structurale, Centre National de la Recherche Scientifique, Unité Mixte de Recherche 7256 (Institut de Microbiologie de la Méditerranée, FR3479), Institut microbiologie, bioénergies et biotechnologie, Origins Institute Marseille, Aix-Marseille University